简要原理:
以重亚硫酸盐处理基因组DNA,发生甲基化的胞嘧啶不变,而未甲基化的胞嘧啶会变成尿嘧啶,经过PCR扩肀增,原本的C/G就变成T/A,可以通过测序区分。该方法检测精确,分辨率最高,但耗时耗力,通量有限。
实验目的:
一般以下情况可以用此方法:精细定量检测目标区段的DNA甲基化情况;结合高通量测序检测全基因组DNA甲基化情况。
试剂:
重亚硫酸盐处理试剂盒
操作步骤:
1. 高质量DNA样品抽提;
2. DNA样品处理:目前基本都是使用商业化的试剂盒,处理方法参照试剂盒说明书;
3. 引物设计:针对检测的目标区域设计PCR引物
4. PCR扩增和产物克隆:以重亚硫酸盐处理后的DNA为模板扩增,回收PCR产物后克隆的T载体上,挑取20个以上的阳性克隆进行测序;
5. 结果分析:结果分析网站。
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实验目的:
一般以下情况可以用此方法:精细定量检测目标区段的DNA甲基化情况;结合高通量测序检测全基因组DNA甲基化情况。
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,西安淳风生物科技有限公司,处理方法参照试剂盒说明书;
3. 引物设计:针对检测的目标区域设计PCR引物
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5. 结果分析:结果分析网站。
简要原理:
以重亚硫酸盐处理基因组DNA,发生甲基化的胞嘧啶不变,而未甲基化的胞嘧啶会变成尿嘧啶,经过PCR扩增,原本的C/G就变成T/A,可以通过测序区分。该方法检测精确,分辨率最高,但耗时耗力,淳风生物科技,dna甲基化检测公司
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3. 引物设计:针对检测的目标区域设计PCR引物
4. PCR扩增和产物克隆:以重亚硫酸盐处理后的DNA为模板扩增,回收PCR产物后克隆的T载体饣上,挑取20个以上的阳性克隆进行测序;
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